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肠道病毒所致各系统感染应该做哪些检查

更新时间:2009.09.02    源自:    浏览次数:2388

  ()周围血象 白细胞计数大多正常在某些肠道病毒感染时可增高中性粒细胞也可增多

  ()病毒分离 般都采取咽拭及粪便作病毒分离和检定尚可从病人的脑脊液胸水心包积液血液疱浆以及活检或尸检取得的组织中分离到病毒标本取得后应立即送检可接种于猴肾人胚肾人羊膜倍体或Hela细胞KB传代细胞中进行组织培养观察细胞病变同时用多种组织培养细胞进行分离可提高阳性率阳性标本再以特异型的免疫血清作中和试验进行型别鉴定疑有柯萨奇A组病毒感染者应将标本经皮下腹腔内或脑内途径接种乳鼠进行病毒分离因其组织培养阳性率不高柯萨奇B组病毒亦可使乳鼠致病

  ()血清免疫学试验 采取双份血清测定型特异抗体水平般可用中和试验补体结合试验酶联免疫吸附试验(ELISA酶标法)放射免疫等法进行测定其中以中和试验最为可靠中和抗体消失最慢型特异性也较强如恢复期抗体水平比早期有≥4倍上升则有极大的诊断意义但因肠道病毒型别众多血清学中和试验工作量大只有当某地已知型肠道病毒流行时以此法进行诊断比较理想

  ()免疫荧光快速诊断法 以荧光染色的免疫抗体来鉴定抗原可达到快速诊断的目的但目前除在脊髓灰质炎病毒感染时应用外在肠道病毒感染时采用不多因需备各种型特异的免疫血清手续繁多最近采用许多血清型共有的VP3-ZC抗原和种与多血清型的VP1衣壳蛋白交叉反应的单克隆抗体改进了免疫诊断方法但目前仍停留于研究阶段

  ()核酸杂交法 由于不同血清型的肠道病毒基因组间存在同源性特别是5′端非编码区部分区域高度保守故可供核酸杂交使近年来对肠道病毒鉴定有了新的飞跃采用探针有以下种:①cDNA探针以病毒RNA某片段为模板由逆转录酶催化产生大多克隆在质粒载体中再把带有显色基因(生物素或地高辛)或同位素的核苷酸掺入到新合成的cDNA链中去加以标记若将标本先经12~24小时组织培养可提高阳性率②RNA探针-由于RNA是单链分子故它与靶序列的杂交反应效率极高般用特异的转录载体克隆肠道病毒RNA探针混合几种RNA探针可使检测病毒型更广RNA探针在特异性和敏感性方面都优于cDNA探针③寡核苷酸探针较上述种探针有下面优点因其链短与等量靶位点完全杂交时间短且可识别靶序列内个碱基的变化可检测点突变又可大量合成价廉此探针因选择5′端非编码区共同序列故可牢固而特异地同大多数临床常见肠道病毒结合为了克服标本中肠道病毒滴度太低的问题近年采用PCR法将单基因或短DNA序列放大再与探针杂交此法已应用于临床在肠道病毒中枢神经系统感染流行时从脑脊液中检测肠道病毒RNA阳性率高可在24小时内得结果比病毒培养平均需6~8天快得多临床标本用PCR扩增后再与非同位素标记肠道病毒探针杂交数小时即有结果大大有助于临床确诊

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